ReadiUse預活化PE-iFluor660串聯染料

簡要概述

R-藻紅蛋白（PE）是從紅藻中分離出來的。它的主要吸收峰在565 nm，次要峰在496和545 nm。我們的PE-iFluor660串聯染料是一種出色的新顏色，由于其獨特的光譜特性而已被驗證用于光譜流式細胞儀應用。ReadiUse預活化的PE-iFluor660 串聯染料是一種活化的PE蛋白，與常規PE相比，可以很容易地偶聯到抗體上，具有更高的結合產率。它為制備PE-iFluor660串聯標記的抗體結合物提供了方便的工具，該結合物可用光譜流式細胞儀檢測。

產品說明書

染色樣本分析

操作步驟

使用BuccutiteMTA制備預活化的抗體

1. 在DMSO中以約10 mg / mL的濃度重建BuccutiteMTA。
   注意：將未使用的MTA存放在-20°C；它 多可用于兩個冷凍和解凍循環。

2. 在pH = 8.5-9.0緩沖液中以1 mg / ml以上的濃度制備目標抗體（Ab）。

3. 將MTA以8-10 μg MTA / 100 μg Ab的比例添加到Ab溶液中。

4. 充分混合并在室溫下反應60分鐘，在反應過程中旋轉。

5. 用脫鹽柱純化反應混合物，以除去任何未反應的MTA。將緩沖液更換為PBS或您選擇的其他緩沖液。

6. 收集MTA活化的抗體。通過原始起始量的70％產率估算濃度。

與預活化的PE-iFluor660串聯在一起

1. 將預活化的PE-iFluor660串聯溶液以100 μL ddH₂O的濃度重新配制至10 mg / mL。
   注意：重建的預活化PE-iFluor660 Tandem不穩定，不能保存超過一個月。

2. 以300μg PE-iFluor660 Tandem / 100 μg MTA活化的Ab的比例直接將預激活的PE-iFluor660 串聯染料添加到MTA活化的目標Ab溶液中。

3. 在室溫下將混合物旋轉1-2小時。

4. Ab / PE--iFluor660串聯綴合物現已準備就緒。
   
   注意：Ab / PE-iFluor660串聯可在4°C下保存兩個月。

5. 可選：Ab / PE-iFluor660串聯可通過尺寸排阻色譜法進一步純化以獲得更好的性能。

圖示

圖1.我們預活化的PE-iFluor660串聯染料已通過我們的BuccutiteFOL（提供）進行了預改性。您的抗體（或其他蛋白質）已通過我們的BuccutiteMTA（作為免費樣品提供）進行了修飾，以提供經MTA修飾的蛋白質（例如抗體）。MTA修飾的蛋白質易于與FOL修飾的PE-iFluor660串聯抗體（提供）反應，以比SMCC化學方法高得多的產率得到所需的PE-iFluor660串聯抗體結合物。此外，我們的預活化PE-iFluor660串聯反應與MTA改性的生物聚合物反應的濃度遠低于SMCC化學反應。